乙酰化低密度脂蛋白的保存與運(yùn)輸需嚴(yán)格遵循以下規(guī)程,以確保其穩(wěn)定性和實(shí)驗(yàn)有效性:
一、保存條件
1.溫度控制
短期保存:2-8℃(通常為4℃)避光保存,避免溫度波動(dòng)。
長(zhǎng)期保存:若需長(zhǎng)期存放,建議分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存(但需注意部分產(chǎn)品明確禁止凍存,需以產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn))。
有效期:通常為6周,但需定期檢查溶液狀態(tài)。
2.避光要求
乙酰化低密度脂蛋白對(duì)光敏感,需用鋁箔包裹或置于避光容器中保存,防止熒光標(biāo)記物降解。
3.溶液狀態(tài)
保存于含EDTA的磷酸鹽緩沖液中,EDTA濃度通常為0.5-5μM,以抑制金屬離子催化的氧化反應(yīng)。
避免使用含甘油或高濃度NaN?的緩沖液(除非產(chǎn)品明確說(shuō)明),因過(guò)量EDTA或防腐劑可能干擾LDL與受體的結(jié)合。
4.沉淀處理
長(zhǎng)期保存后可能出現(xiàn)沉淀,屬正常現(xiàn)象。使用前低速離心去除沉淀,取上清液使用。
1.溫度維持
運(yùn)輸過(guò)程中需使用冰袋或干冰維持低溫,避免反復(fù)凍融。
短途運(yùn)輸(如實(shí)驗(yàn)室間傳遞)可用冰袋;長(zhǎng)途或國(guó)際運(yùn)輸需使用干冰,并確保包裝符合航空運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)。
2.避光與防震
使用避光包裝材料(如棕色玻璃瓶或鋁箔袋),并填充緩沖物(如泡沫、氣柱袋)防止震動(dòng)導(dǎo)致蛋白變性。
3.標(biāo)簽與文件
包裝外需標(biāo)注“生物危險(xiǎn)品”“易碎品”“避光保存”等標(biāo)識(shí),并附產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)、MSDS(材料安全數(shù)據(jù)表)及運(yùn)輸溫度記錄。
三、乙酰化低密度脂蛋白使用注意事項(xiàng)
1.現(xiàn)配現(xiàn)用
工作液極不穩(wěn)定,建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求單次配制,避免反復(fù)凍融或長(zhǎng)時(shí)間存放。
2.無(wú)菌操作
操作時(shí)需穿戴實(shí)驗(yàn)服、手套,并在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,防止污染。
3.金屬離子控制
LDL與受體的結(jié)合需Ca²?和Mn²?參與,過(guò)量EDTA會(huì)抑制結(jié)合。若實(shí)驗(yàn)需金屬離子,可提前用透析或超濾去除EDTA。
4.熒光標(biāo)記物保護(hù)
若使用熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白,需避免長(zhǎng)時(shí)間光照或暴露于氧化性物質(zhì),防止熒光淬滅。
