綠色熒光標(biāo)記人源乙酰化低密度脂蛋白產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

LDL是由極低密度脂蛋白（VLDL）轉(zhuǎn)變而來，主要功能是把Cholesterol運(yùn)輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞，運(yùn)輸?shù)礁闻K合成膽酸，其可用于研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過程，尤其是在動(dòng)脈粥樣硬化等疾病中，其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。

乙酰化的LDL是修飾LDL中的一類，LDL含有未修飾的載脂蛋白，可以用來研究正常Cholesterol的轉(zhuǎn)運(yùn)和內(nèi)吞作用。當(dāng)LDL載脂蛋白的賴氨酸殘基被乙酰化修飾后，LDL復(fù)合物不再與LDL受體結(jié)合，但是，修飾型LDL更容易與內(nèi)皮細(xì)胞和小膠質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的“scavenger”受體結(jié)合。因此，Ac-LDL可用來研究上述細(xì)胞的功能。

人源乙酰化低密度脂蛋白（Human Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL），來自健康人源血漿LDL，Hepatitis C，HIV-I和HIV-II抗體檢測(cè)均為陰性。當(dāng)DiO-Ac-LDL標(biāo)記細(xì)胞后，在溶酶體酶的作用下，脂蛋白被降解，而DiO在細(xì)胞內(nèi)膜聚集，從而可以用來檢測(cè)修飾型LDL的吸收情況。可以用來標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPC），可用來鑒定并分選這些細(xì)胞，以及用來研究不同細(xì)胞系對(duì)修飾化LDL的內(nèi)吞作用。我司提供的DiO-Ac-LDL，每個(gè)批次均經(jīng)過牛大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和小鼠巨噬細(xì)胞的標(biāo)記檢測(cè)來評(píng)估產(chǎn)品的標(biāo)記特異性，從而保證結(jié)果的一致性。

本品為綠色熒光標(biāo)記人源乙酰化低密度脂蛋白（Human DiO-Ac-LDL）為無菌包裝，可以直接稀釋使用。除提供Human DiO-Ac-LDL，我們還提供不帶標(biāo)記的Ac-LDL，Ox-LDL（氧化修飾）以及不經(jīng)修飾的LDL等。

產(chǎn)品屬性：

純度：＞98%

濃度：0.8-3.0 mg/ml

外觀：乳狀液體

緩沖液組分：0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4

運(yùn)輸與保存方法：冰袋運(yùn)輸。4℃保存，建議避光，6周穩(wěn)定。千萬不可凍存

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中將DiO-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml；

2. 將其加入到細(xì)胞中37 ºC溫育4小時(shí)；

3. 去掉培養(yǎng)基；

4. 用無探針的緩沖液沖洗；

5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細(xì)胞通過Trypsin（或者EDTA）進(jìn)行分類；

6. 熒光顯微鏡：用標(biāo)準(zhǔn)FITC激發(fā)進(jìn)行觀察 （或者建議用波長(zhǎng)激發(fā)：484nm、發(fā)射：501nm）。如果需要，用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進(jìn)行固定，因?yàn)镈iO溶于有機(jī)溶劑。

注意事項(xiàng)：

1本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定，建議即配即用；

2長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出，屬于正常現(xiàn)象，低速離心2 min去除沉淀即可使用；

3為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。